ساخت پلاسمید pds۱۳۲::∆icsa جهت حذف هدفمند نواحی از ژن icsa به منظور تولید واکسن زنده تخفیف حدت یافته شیگلا

Authors

مصطفی حسینی

mostafa hosseini applied biotechnology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iranتهران، میدان ونک، خیابان ملاصدرا، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا... (عج)، پژوهشگاه، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی کاربردی مجتبی سعادتی

mojtaba saadati biology department, imam hosseini university, tehran, iranگروه علوم زیستی، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (baqiyatallah university of medical sciences) محمد باقر یخچالی

mohammad bagher yakhchali 3- department of industry and environment, research center of genetic engineering and biotechnology, tehran, iranروه صنعت و محیط زیست، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایرانسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه جامع امام حسین (imam hosseyn university) بهار نیری فسایی

bahar nayeri fasaei department of microbiology, faculty of veterinary medicine, university of tehran, tehran, iranگروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهرانسازمان اصلی تایید شده: پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری حورا احمدی دانش

abstract

زمینه و هدف: واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا پاسخ های امیدبخشی در ایجاد ایمنی حفاظتی در آزمایشات بالینی بر روی انسان را نشان داده اند. هدف از این تحقیق طراحی و ساخت پلاسمید pds132::∆icsa به عنوان یک ناقل انتحاری برای حذف هدفمند بخشی از ژن icsa در شیگلا می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، گونه و سرووار شیگلای جدا شده از نمونه های کودکان مبتلا به اسهال، در بیمارستان های فیروزآبادی و میلاد تهران، با استفاده از آزمایش سرم شناسی و واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد تایید قرار گرفت. آغازگرهای شناسایی ژن icsa طراحی و سپس در حامل pgem-5zf همسان سازی و تعیین توالی گردید. بر اساس نقشه برش آنزیمی ژن icsa، 1751 جفت باز از ژن icsa با استفاده از آنزیم محدودکننده hincп حذف و ژن جهش یافته ∆icsa به طور موفقیت آمیزی ایجاد گردید. حامل pgem∆icsa با استفاده از آنزیم های sphi و sali هضم گردید و سپس در حامل انتحاری (psd132) همسانه سازی شد. صحت فرآیند با آزمایش های فنوتیپی و ژنوتیپی تایید گردید. یافته ها: سویه شیگلا دیسانتری تیپ1 با آزمایش سرولوژیکی و pcr تایید گردید. توالی ژن icsa سویه بومی با سویه های ثبت شده در بانک ژنی یکسان بود. حامل انتحاری pds132::∆icsa با در بر داشتن 1484 جفت باز، مشتق شده از ژن icsa می تواند به عنوان یک ناقل انتحاری اختصاصی در ایجاد تداخل در ژن icsa به کار رود. نتیجه گیری: استفاده از سیستم های انتحاری ایجاد جهش هدف مند را تسهیل و در مقایسه با سایر تکنیک های اولیه مانند پاساژ متوالی روش اختصاصی و موثرتری می باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

طراحی و ساخت حامل انتحاری pds۱۳۲::∆virg به منظور حذف ژن virg در شیگلا فلکسنری ۲a برای تولید سویه واکسنی زنده تخفیف حدت یافته شیگلا

زمینه و هدف: سویه های شیگلا باکتری های گرم منفی هستند که واجد توانایی ورود به درون سلول های غیر فاگوسیتیی، از طریق ترشح پروتئین های افکتور (که آنتی ژن های تهاجمی نامیده می شوند (ipas)) می باشند. یکی از مهمترین آنها پروتئینvirg است. واکسن های زنده تخفیف حدت یافته شیگلا، پاسخ های امیدوار کننده ای را در ایجاد ایمنی حفاظتی در مطالعات بالینی بر روی انسان از خود نشان داده اند. در شرایط حاضر، ساخت سوی...

full text

بررسی کارآیی واکسن زنده تخفیف حدت یافته برونشیت عفونی سویه B08IR/ا793 ساخت موسسه رازی

از واکسن‌هایی که در حال حاضر برای کنترل بیماری برونشیت عفونی طیور مورد استفاده قرار می‌گیرد، واکسن حاوی سویه i793/Bمی‌باشد. بدنبال اثبات حضور ویروس i793/B در اکثر مرغداری‌های کشور واکسن زنده تخفیف حدت‌یافته برونشیت عفونی سویه i793/B081R، در موسسه رازی تولید شد. هدف از انجام این پروژه ارزیابی کارآیی واکسن i793/B081Rبر اساس پروتکل OIE با استفاده از ارزیابی فعالیت مژک‌های نای (Ciliary activity) پر...

full text

همسانه سازی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا دیسانتری بومی

سابقه و هدف: بیماری شیگلوز از علل عمده ابتلا کودکان به اسهال در ایران است و ژن virG نقش کلیدی را در بیماری‌زایی و قدرت تهاجم باکتری شیگلا بازی می‌کند. هدف از این مطالعه، همسانه سازی، توالی یابی ژن virG و ساخت سازه جهش یافته pGEM∆virG به منظور القای نوترکیبی در سویه شیگلا بومی با هدف ساخت سویه کاندید واکسنی زنده تقلیل حدت یافته است. روش بررسی: با استفاده از آزمون‌های بیوشیمیایی، سویه شیگلای بوم...

full text

شناسایی، همسانه سازی، تعیین توالی ژن virG و ایجاد سویه بومی تخفیف حدت یافته virGΔ با استفاده از سیستم λ Red recombinase

باکتری شیگلا و سویه های اشرشیا کلی مهاجم روده ای (EIEC) جزء خانواده با کتریهای گرم منفی و عامل مسری ترین اسهال باسیلی (شیگلوز) می باشند. ژن virG یکی از  فاکتور های ضروری در آسیب زایی باکتری شیگلا است. پروتئین رمزگذاری شده توسط این ژن، بر روی غشای خارجی (OM) شیگلا قرار گرفته و به خانواده پروتئینهای خود منتقل شونده AT (Autotrnasporter) خارج سلولی در باکتریهای گرم منفی تعلق دارد. یکی از روشهای ساخ...

full text

طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی-بیوتیک کانامایسین در بروسلا ملی‌تنسیس سویه Rev1 جهش‌یافته برای تولید سویه کاندید واکسن

زمینه و اهداف: بروسلوز از مهم‌ترین بیماری‌های مشترک انسان و دام محسوب می‌گردد. بهترین راه مقابله با بروسلوز انجام واکسیناسیون مناسب می­باشد. واکسن­های موجود از قبیل واکسن Rev1 با معایبی چون سقط جنین در حیوانات باردار همراه است لذا تهیه واکسن مناسب برای درمان بروسلوز ضروری می­ باشد. هدف از انجام این مطالعه، طراحی و ساخت وکتور خودکشی pDS132-ΔkanR به منظور حذف ژن مقاومت به آنتی­بیوتیک کانامایسین د...

full text

ارزیابی واریته تخفیف حدت‌یافته نئوسپورا کنینوم به عنوان واکسن زنده تجربی در موش

تک‌یاخته نئوسپورا کانینوم (Neospora caninum)، به عنوان یکی از مهم‌ترین عوامل عفونی بروز سقط جنین در گله‌های گاو در سراسر جهان شناخته می‌شود و از این طریق خسارات بالایی را به صنعت گاوداری در جهان وارد می‌آورد. در حال حاضر بیشترین توجه در تحقیقات جهانی به سوی واکسن زنده معطوف گردیده است؛ در این تحقیق با ارزیابی واریته‌ نئوسپورا کانینوم موسسه رازی در قالب واکسن سعی شده واکسن مؤثرتری برای عفونت نئو...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک

جلد ۱۵، شماره ۲، صفحات ۳۵-۴۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023